Penyediaan media kebudayaan apa yang terdiri daripada, objektif dan langkah

The penyediaan media kebudayaan Ia merupakan kaedah rutin yang digunakan dalam makmal untuk pertumbuhan mikroorganisma yang dikehendaki. Media kultur adalah pepejal, cecair atau separuh pepejal yang mempunyai semua nutrien yang diperlukan untuk pembangunan populasi mikroba.

Secara umum, cara-cara untuk memupuk mikroorganisma kaya dengan asid protein dan amino dan biasanya mengandungi komponen yang menggalakkan pertumbuhan organisma yang hendak dikaji, seperti vitamin, darah, serum, dan lain-lain.

Tidak ada media budaya umum atau universal, kerana komposisinya berbeza-beza mengikut keperluan mikroorganisma yang berminat. Sesetengah bakteria boleh berkembang dalam mana-mana medium budaya, tetapi yang lain mempunyai keperluan khusus.

Indeks

• 1 Apa itu terdiri daripada??
  • 1.1 Agar
  • 1.2 Bendalir
  • 1.3 ekstrak
  • 1.4 Peptones
  • 1.5 penyerap kejutan
• 2 Objektif
• 3 Jenis media
  • 3.1 Berdasarkan susunannya
  • 3.2 Berdasarkan jenis mikroorganisma
• 4 langkah
• 5 Rujukan

Apa itu terdiri daripada??

Mikroorganisma, seperti kulat dan bakteria, tidak boleh dikaji secara individu kerana saiznya yang kecil. Oleh itu, mereka mesti ditanam dalam cara tiruan yang membolehkan peningkatan yang signifikan dalam populasi.

Contohnya, jika kita ingin mengkaji bakteria kita perlu menyediakannya dengan keadaan yang betul agar mereka boleh membiak dan membentuk koloni (yang boleh dilihat dengan mata kasar).

Penyediaan media kultur berbeza-beza bergantung kepada jenis mikroorganisme yang ingin dikembangkan. Sebelum menyiapkannya, perlu mengetahui keperluan nutrisi asas badan kerja.

Seterusnya, komponen yang paling biasa digunakan dalam media kultur akan digambarkan mempunyai idea umum penyediaan mereka:

Agar

Ia digunakan dalam tanaman sebagai agen gelling dan ditambahkan apabila mencari padat atau sederhana pepejal sederhana. Ejen padat pertama yang digunakan dalam penyediaan media adalah gelatin, tetapi pada tahun 1883 agar diperkenalkan ke dunia bakteriologi oleh W. Hesse.

Bacteriological agar sebagai komponen utamanya polysaccharide cawangan kompleks yang diekstrak daripada alga. Kompaun ini digunakan sebagai pemekat bagi makanan biasa seperti ais krim dan kesesakan.

Ia adalah unsur yang sangat berharga dalam mikrobiologi kerana beberapa sebab. Terutamanya kerana mikroorganisma tidak boleh menurunkannya, cecair pada suhu 100 ° C dan kekal dalam keadaan cecair sehingga mencapai 45 ° C atau kurang.

Sekiranya anda ingin menyediakan medium padu, kepekatan agar kira-kira 1.5%, manakala separuh pepejal hendaklah disediakan dari 0.3 hingga 0.5%.

Bendalir

Penanaman organisma patogen memerlukan cecair badan supaya mereka dapat berkembang seperti yang mereka alami di alam semulajadi mereka. Atas sebab ini, darah keseluruhan atau defibrilasi ditambah. Cecair itu diekstrak dari haiwan yang sihat dan, apabila disterilkan, ditambah kepada medium budaya.

Ekstrak

Mereka diperolehi dari bahagian-bahagian haiwan yang berbeza (seperti daging atau hati) atau sayur-sayuran (benih) dan diproses untuk mendapatkan pekat padat dalam bentuk pasta atau serbuk. Yang paling biasa adalah ragi, malt dan daging.

Peptones

Sebatian organik ini diperolehi oleh hidrolisis enzim atau kimia haiwan atau tisu sayur-sayuran. Tujuannya adalah untuk menambah kandungan yang kaya dengan asid amino, yang merupakan unit asas protein.

Penyerap kejutan

Buffer atau sistem penampan mengelakkan perubahan secara tiba-tiba dalam pH dan membantu mengekalkan jarak optimum yang dibenarkan oleh badan.

Kebanyakan organisma boleh berkembang dengan baik pada pH 7, walaupun sesetengah bakteria lebih suka media alkali. Walau bagaimanapun, terdapat bakteria yang menentang variasi pH antara nilai-nilai 6 dan 9.

PH spesies sensitif, kerosakan yang tidak disebabkan oleh terlalu banyak ion hidrogen atau hidroksil, tetapi dengan meningkatkan asid lemah atau asas yang boleh menembusi sel.

Juga, penunjuk pH untuk memantau dan mengelakkan penyimpangan yang disebabkan oleh penapaian atau proses lain ditambah.

Objektif

Objektif utama apabila menyediakan medium budaya adalah untuk menambahkan semua komponen yang diperlukan untuk membolehkan pembangunan organisma yang berjaya yang ingin diasingkan. Komponen dan nutrien yang paling berkesan mesti dikenalpasti untuk mencapai medium yang dikehendaki.

Kedua-dua penyediaan dan penyimpanan media adalah penting untuk memastikan pertumbuhan yang berjaya, kerana langkah-langkah ini bergantung kepada komposisi alam sekitar dan ketersediaan nutrien.

Kita mesti mengambil kira organisma yang semakin meningkat adalah satu tugas yang dipengaruhi oleh beberapa faktor luaran untuk medium budaya, kerana keamatan cahaya kejadian, suhu dan tahap keasidan atau kealkalian sederhana. Oleh itu, setiap pembolehubah ini mesti diambil kira.

Jenis media

Berdasarkan komposisinya

Berdasarkan komposisinya, terdapat tiga jenis tanaman utama: sintetik atau bahan kimia sintetik semulajadi atau sintetik dan ditakrifkan.

Persekitaran semulajadi

Dalam persekitaran semulajadi komposisi yang tepat tidak diketahui. Ini termasuk bahan-bahan seperti susu, darah cair, jus sayuran, ekstrak dan infusions daging dan pepton. Atas sebab-sebab ekonomi, komponen kos rendah sering ditambah seperti ekstrak soya, whey, molase, dan sebagainya..

Media separa sintetik

Ia dipanggil medium separuh sintetik jika komposisinya diketahui sebahagiannya. Mana-mana medium yang mengandungi agar menjadi medium separuh sintetik.

Di antaranya kita mempunyai papa dextrose agar, czapek-dox agar, oat agar, peptone daging agar, antara contoh lain.

Sederhana atau bahan kimia yang ditakrifkan

Dalam kes ini komposisi medium - dari segi jumlah karbon, nitrogen, sulfur, fosforus dan apa-apa sumber faktor pertumbuhan lain - diketahui sepenuhnya. Ia sangat berguna sekiranya anda ingin mendapatkan hasil yang boleh dihasilkan untuk penyelidik lain.

Bagi apa yang dipanggil "mikroorganisma dengan keperluan pertumbuhan khas" adalah perlu untuk menambah komponen yang diperlukan. Contoh jenis ini ialah Lactobacillus.

Berdasarkan jenis mikroorganisma

Begitu juga, terdapat klasifikasi lain untuk media kultur berdasarkan jenis mikroorganisma yang boleh berkembang di dalamnya. Berikutan prinsip ini, kami mempunyai cara pengayaan umum, selektif dan perbezaan. Setiap satu diterangkan di bawah:

Am bermakna

Ini mengakui perkembangan pelbagai jenis mikroorganisma. Jika mana-mana organisma memerlukan syarat-syarat khas untuk pertumbuhannya, ia tidak dapat berkembang dengan jayanya dalam jenis tanaman ini.

Pengayaan bermakna

Cara pengayaan memihak kepada pertumbuhan jenis mikroorganisma tertentu, tetapi tiada bahan yang telah ditambahkan untuk menghalang jenis mikroba lain daripada berkembang di dalamnya..

Media selektif

Mereka mencari pertumbuhan tertentu mikroorganisma, memanggilnya kulat, bakteria, protozoa, antara lain. Untuk melakukan ini, mereka menghalang perkembangan orang lain.

Untuk mencapai matlamat ini boleh ditambah bahan kimia berbahaya kepada sekumpulan besar organisma dan tidak merbahaya kepada organisma menarik atau menambah sumber tenaga yang hanya mencari assimilable oleh mikrob.

Media selektif digunakan semasa mengambil sampel perubatan untuk mengembangkan mikroorganisma patogen. Di sini adalah perlu untuk memihak pertumbuhan patogen dan menghalang perkembangan flora mikroba biasa dari pesakit.

Bismuth sulphite agar, sebagai contoh, tidak membenarkan pertumbuhan bakteria gram-positif dan sebilangan besar bakteria yang terdapat dalam rongga gastrointestinal. Oleh itu, ia digunakan untuk memupuk bakteria gram-negatif yang menyebabkan demam kepialu, Salmonella typhi dalam contoh-contoh tahi.

Media pembezaan

Jenis ini menggunakan beberapa ciri diagnostik organisma kepentingan (keanehan dalam metabolismenya, sebagai contoh) untuk dapat mengenalinya daripada spesies lain yang tumbuh di persekitaran yang sama.

Kedua-dua media berbeza dan media terpilih berguna dalam bidang mikrobiologi klinikal dan kesihatan awam, kerana disiplin ini perlu untuk mengesan kehadiran mikroorganisma tertentu penyakit atau keadaan kebersihan yang buruk yang berkaitan.

Bahan penunjuk boleh ditambah kepada tanaman yang memberikan ciri khas kepada koloni yang dikehendaki. Sebagai contoh, agar-eosin-metilena biru (disingkat EMB) dan MacConkey-agar ditambah dengan laktosa dan penunjuk pH.

Oleh itu, apabila koloni dibangunkan dalam media ini dengan keupayaan untuk menapai laktosa dan menghasilkan aldehida, ia dapat dilihat dalam warna khas.

Langkah-langkah

Pada masa ini media kebudayaan boleh dibeli dalam bentuk lyophilized. Oleh itu, penyediaannya dipermudahkan dan hanya produk yang direhabilitasi. Kandungan harus ditimbang (dengan mengambil kira kuantiti terakhir yang anda ingin sediakan) dan dibubarkan dalam air suling berikutan semua tanda-tanda produk.

Kandungan media cecair mesti dibahagikan kepada bekas yang dikehendaki (hidangan Petri, tiub, dan lain-lain) untuk pensterilan berikutnya. Untuk mengagihkan medium pepejal ia perlu mencairkannya dengan menggunakan gelombang mikro atau dengan menundukkan bahan tersebut ke dalam tab mandi air. PH medium mesti diselaraskan.

Biasanya agar digunakan dalam tiub ujian atau dalam hidangan Petri. Sekiranya agar melegalkan dalam kedudukan yang cenderung, dengan sudut yang sesuai supaya kelebihan terminal terakhir adalah pepenjuru, susunan ini dikenali sebagai puncak seruling atau tiub cenderung. Apabila agar menguatkan dalam kedudukan menegak sepenuhnya ia dipanggil "mendalam".

Selepas mensterilkan media - menggunakan autoklaf - mereka dibenarkan untuk menyejukkan. Ini perlu dikendalikan dalam persekitaran yang bebas daripada mikroorganisma, yang paling biasa adalah untuk bekerja dengan lebih ringan dalam memastikan persekitaran yang aseptik di sekitarnya.

Rujukan

1. Celis, J. E. (2006). Biologi sel: buku panduan makmal (Vol. 2). Elsevier.
2. Finegold, S.M., Bailey, W. R., Baron, E.J., Fineglod, S. M., & Scott, E. G. (1991). Bailey Scott: diagnosis mikrobiologi. Pan American Medical.
3. Olivas, E. (2004). Manual Amalan Mikrobiologi I dan II dan Parasitologi. Universiti Autonomi Ciudad Juárez.
4. Schlegel, H. G., & Zaborosch, C. (1993). Mikrobiologi am. Cambridge University Press.
5. Tortora, G. J., Funke, B. R., & Case, C. L. (2007). Pengenalan kepada mikrobiologi. Ed. Panamericana Medical.