Asas air, persediaan dan penggunaan peptone



The air peptonada ia adalah medium pengayaan cecair tidak terpilih, yang digunakan terutamanya sebagai bahan pencuci untuk sampel makanan atau bahan lain. Ini bermakna dari sudut pandangan kimia adalah sangat mudah, mengandungi peptone daging, natrium klorida dan air.

Ia mempunyai nilai pemakanan tertentu, yang membolehkan untuk memperkayakan sampel. Sekiranya terdapat bakteria yang telah dipukul, ini bermakna kuasa untuk memperbaiki daya maju. Ia amat berguna dalam pemulihan bakteria milik keluarga Enterobacteriaceae.

Dalam kes pemulihan Salmonellas, penggunaan varian air peptonada buffered adalah disyorkan; Ini berfungsi sebagai alat pra-pengayaan sampel, dalam hal ini ia mengandung unsur-unsur lain seperti disodium fosfat dan dipotassium fosfat.

Biasanya air pepton disediakan pada pH neutral, varian namun lain di mana perlu pH ialah 8.5 ± 0.2 (alkali), kerana bakteria itu dicadangkan untuk mengasingkan alkalophilic, seperti Vibrio cholerae.

Sebaliknya, medium ini boleh digunakan sebagai medium asas untuk ujian penapaian karbohidrat.

Indeks

  • 1 Yayasan
  • 2 Persediaan
    • 2.1 Persediaan rumah (bukan komersial)
    • 2.2 Penyediaan menggunakan medium komersial
    • 2.3 Persediaan untuk ujian penapaian
    • 2.4 Varian lain peptonada air
  • 3 Gunakan
    • 3.1 Sampel kembangan
    • 3.2 Sampel makanan
  • 4 Kawalan kualiti
  • 5 Had
  • 6 Rujukan

Yayasan

Peptones menyediakan nutrien yang diperlukan untuk pembangunan bakteria, terutamanya asid amino rantai nitrogen dan pendek, manakala natrium klorida mengekalkan keseimbangan osmosis.

Di samping itu, medium ini membenarkan penyebaran, homogenisasi dan pembaikan sel bakteria yang telah rosak oleh proses perindustrian..

Sebagai pencair, ia adalah ideal, dengan berkesan menggantikan penyelesaian fisiologi (SSF) atau penampan fosfat (PBS).

Pertumbuhan bakterinya jelas dengan memerhatikan kekeruhannya.

Persediaan

Penyediaan buatan sendiri (bukan komersial)

Timbang 1 g peptone dan 8.5 g natrium klorida, larut dalam 1 liter air sulingan. PH perlu diselaraskan kepada 7.0. Untuk ini, anda boleh menggunakan 1 N natrium klorida.

Penyediaan menggunakan medium komersial

Timbang 15 gr medium dehidrasi dan larut dalam satu liter air sulingan. Homogenkan campuran. Jika perlu, campuran direbus selama 1 minit untuk membantu pembubaran total. Hidangkan dalam 100 ml botol atau dalam 10 ml tiub yang diperlukan. Autoklaf pada 121 ° C selama 15 minit.

Percuma dan gunakan atau simpan di dalam peti sejuk. PH akhir medium ialah 7.2 ± 0.2.

Warna medium dehidrasi adalah cahaya kuning air dan disediakan adalah ambar ringan.

Persediaan untuk ujian penapaian

Penyediaan atas -Sebelum disterilkan perlu ditambah karbohidrat kepada kepekatan akhir sebanyak 1%, lebih penunjuk Andrade (Fuchsin asid) atau fenol merah (0.018 g / L). Sebuah bel Durham untuk pemerhatian pembentukan gas perlu diletakkan pada tiub.

Varian air peptonada yang lain

-Peptone air buffered atau buffered

Ia mengandungi kasein enzimatik hidrolisis, natrium klorida, kalium dihydrogen fosfat dan natrium hidrogen fosfat dodecahydrate. PH terakhir ialah 7.0 ± 0.2.

Untuk penyediaannya, timbang 20 g medium dehidrasi dan larut dalam 1 liter air sulingan. Biarkan selama 5 minit kira-kira. Panaskan selama 1 minit sehingga dibubarkan sepenuhnya.

Tuangkan botol sesuai yang diperlukan. Memanaskan menggunakan autoklaf pada 121 ° C selama 15 minit.

-Air beralkali beralkali

Timbang 25 g medium dehidrasi dan larut dalam 1 liter air. Teruskan seperti yang diterangkan di atas. PH berkisar antara 8.3 hingga 8.7.

Guna

Inokulum dilakukan dengan meletakkan sampel secara langsung.

Ia digunakan untuk mencairkan sampel, terutamanya apabila disyaki bahawa bakteria mungkin rosak. Biasanya pencairan adalah 1:10 dan 1: 100.

Inkubasi selama 24 jam dalam aerobiosis pada 35-37 ° C.

Sampel bangku

Bagi sampel tinja yang mencari Salmonella, penggunaan air buffered atau buffered sebagai medium pra-pengayaan adalah disyorkan..

Untuk melakukan ini, teruskan seperti berikut:

Jika najis dibentuk, ambil 1 g sampel. Sekiranya mereka cair, ambil 1 ml najis dan gantungkan di dalam tiub dengan 10 ml air bertaburan buffered. Dalam hal swab rektum, pelepasan bahan yang terkandung di dalam swab ke dalam tiub dengan air ptontan buffered.

Dalam semua kes, campurkan dan homogenkan sampel dengan sangat baik.

Inkubator pada suhu 37 ° C selama 18 hingga 24 jam. Selepas itu sub-kultur dalam sup pengayaan sebagai sup cystine selenite atau tetrationate pada 37 ° C selama 18-24 jam. Akhirnya ditanam dalam media selektif untuk Salmonella, seperti SS agar, XLD agar, Hektoen agar, antara lain.

Sampel makanan

Air pepton digunakan sebagai medium pengayaan atau pelarut seperti mudah, tetapi sekiranya spesies Salmonella yang dicari digunakan sebagai pra-pengayaan, seperti yang telah diterangkan.

Dalam makanan teruskan seperti berikut:

Untuk makanan pepejal seberat 25 gr sampel dan makanan cecair mengukur 25 ml itu. Tempat berkata bahagian dalam kalis air mengandungi 225 ml air. Campurkan dan homogenkan sampel.

Jika disyaki bahawa beban mikrob adalah pencairan bersiri tinggi atau perpuluhan boleh dibuat untuk memudahkan penghitungan unit pembentukan koloni (CFU).

Bilangan peleburan akan bergantung pada jenis sampel dan pengalaman analisis.

Jika sebaliknya ia disyaki bahawa beban mikroba adalah sangat rendah, tidak perlu membuat pencairan. Selanjutnya, subkultivate dalam media selektif.

Dalam hal makanan dari laut, seperti makanan laut, ikan, antara lain, untuk mencari Vibrio cholerae atau spesies Vibrio yang lain, air peptone diselaraskan dengan pH 8.5 (air peptonated alkali) harus digunakan.

Kawalan kualiti

Dari setiap kumpulan disediakan, satu hingga dua tiub harus diinkubasi tanpa inokulasi selama 24 jam dalam aerobiosis pada 37 ° C. Pada akhir masa, tiada kekeruhan atau perubahan warna harus diperhatikan.

Selain itu, strain kawalan yang terkenal boleh digunakan untuk menilai keberkesanannya:

Untuk ini, strain bakteria berikut boleh digunakan: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8927, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 1428, Salmonella enteritidis ATCC 13076.

Dalam semua kes, perkembangan mikrob yang memuaskan dijangka, yang diperhatikan oleh kekeruhan medium.

Had

-Media dehidrasi sangat menyerap, jadi ia harus dijauhkan dari kelembapan.

-Media ini tidak boleh digunakan jika terdapat beberapa jenis kemerosotan.

-Media kultur yang dikeringkan hendaklah disimpan antara 10 - 35 ° C

-Medium yang disediakan hendaklah disimpan dalam peti sejuk (2-8 ° C).

Rujukan

  1. Camacho A, Giles M, Ortegón A, Palao M, Serrano B dan Velázquez O. Teknik untuk Analisis Mikrobiologi Makanan. 2009, ed ed. Fakulti Kimia, UNAM. Mexico Versi Pentadbir Manual dan Dokumen (AMyD) Fakulti Kimia, UNAM 1. Boleh didapati di: http://depa.fquim.unam.mx
  2. Makmal Britania. Air peptonada buffered. 2015. Boleh didapati di: britanialab.com
  3. Neogen Laboratories Air peptone. Boleh didapati di: foodsafety.neogen.com
  4. Makmal Britania. Air peptone. 2015. Boleh didapati di: britanialab.com
  5. Merck Laboratories Air peptone buffered. Boleh didapati di: merckmillipore.com
  6. Makmal Conda Pronadisa. Air beralkali beralkali. Boleh didapati di: condalab.com
  7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Argentina.