Yayasan suplemen selenite, penyediaan dan kegunaan



The sup selenite Ia adalah medium budaya cecair terpilih. Ia direka oleh Leifson untuk memperkayakan sampel di mana kehadiran bakteria enteropatogen dari genus Salmonella disyaki..

cara ini memenuhi keperluan Persatuan Kesihatan Awam Amerika (APHA), dan oleh itu diterima untuk penyiasatan Salmonella dalam sampel najis, air kencing, makanan cecair atau pepejal, air, dan lain-lain.

Komposisi kimia yang ia nikmati pemulihan mikroorganisma ini dan seterusnya menghalang pertumbuhan orang lain. Ia terutamanya toksik kepada kebanyakan bakteria milik keluarga Enterobacteriaceae. Walau bagaimanapun, ia juga membolehkan pemulihan ketegangan Shigella dan tidak menghalang pertumbuhan Pseudomonas dan Proteus..

Ia terdiri daripada natrium hidrogen selenite anhydrous, natrium fosfat anhidrat, pepton dan laktosa. Terdapat juga varian yang mana sistinin ditambah, oleh itu namanya sup selenite-cystine.

Pada masa ini penggunaan Selenite cystine sup yang disukai, sejak pemulihan peratusan lebih tinggi setara dengan diperhatikan dengan media terpilih lain untuk tujuan yang sama Salmonella, seperti natrium tetrathionate sup diperolehi.

Indeks

  • 1 Yayasan
  • 2 Persediaan
    • 2.1 - Selena
    • 2.2 -Penyediaan medium komersil
    • 2.3 Variant sup selenite-cystine
  • 3 Kegunaan
  • 4 dibiakkan
  • 5 Kawalan kualiti
  • 6 Batasan
  • 7 Rujukan

Yayasan

Peptone yang terkandung dalam sup itu berfungsi sebagai nutrien untuk perkembangan mikroorganisma yang betul. Salmonella strains menggunakan peptones sebagai sumber nitrogen, vitamin dan asid amino.

Laktosa adalah karbohidrat beragi, manakala natrium selenite adalah perencat yang memperlahankan pertumbuhan bakteria Gram-positif dan kebanyakan bakteria di dalam flora usus, terutamanya dalam keluarga Enterobacteriaceae itu. Natrium fosfat adalah penimbal yang menstabilkan pH medium.

Dalam kes varian selenite yang mengandung L-cystine, sebatian tambahan ini adalah agen pengurangan yang meminimumkan ketoksikan selenite, meningkatkan pemulihan Salmonella.

Persediaan

-Sup selenite

Sekiranya anda mempunyai komponen campuran yang anda boleh menimbang:

4 gr natrium hidrogen selenit anhydrous.

10 g natrium fosfat anhydrous.

5 gr daripada peptonas.

4 gr laktosa.

Larutkan sebatian dalam 1 liter air suling steril. Ia boleh dipanaskan sedikit untuk dibubarkan secara keseluruhannya.

Sesetengah makmal mendedahkan medium selama 10 minit dalam stim fisi untuk mensterilkannya, kerana autoklaf tidak boleh digunakan. Jika media disterilkan, ia boleh disimpan di dalam peti sejuk sehingga ia digunakan.

Ia juga boleh disiapkan tanpa mensteril dan berkhidmat 10 hingga 15 ml ke tiub ujian steril.

Dalam kes ini, ia perlu ditinggalkan dan digunakan dengan serta-merta. Oleh kerana medium tidak steril, ia tidak boleh disimpan dalam peti sejuk untuk digunakan kemudian.

-Penyediaan medium komersial

Jika media komersial tersedia, 23 g medium dehidrasi ditimbang dan dibubarkan dalam satu liter air suling steril. Hangat ringkas untuk menyelesaikan pembubaran. Jangan sembah di autoclave. Hidangkan 10 atau 15 ml dalam tiub ujian steril secara aseptik.

PH akhir medium hendaklah 7.0 ± 0.2.

Perlu diingatkan bahawa warna medium dehidrasi adalah kuning air dan penyediaannya adalah ambar yang jelas dan lut.

Varian selenite-cystine sup

Ia mengandungi sebatian yang sama dari sup selenite, tetapi 10 mg sistinin ditambah. Selebihnya prosedurnya sama seperti yang diterangkan di atas.

Kegunaan

Media ini khusus untuk digunakan dalam kajian epidemiologi, dalam kes-kes di mana penyakit ini tidak berada di peringkat akut, pesakit tanpa gejala atau pembawa yang sihat.

Pengasingan genus Salmonella biasanya sukar, kerana biasanya didapati mencemari sampel dengan cara yang langka. Sedang dalam kuantiti yang kecil mudah ditenggelami oleh pertumbuhan genera bakteria lain yang didapati dalam kuantiti yang lebih besar.

Sebaliknya, bahan mentah yang diproses makanan diproses sering terdedah kepada haba, untuk proses dehidrasi, penggunaan kuman, radiasi dan pengawet, antara lain..

Oleh itu, Salmonellas yang terdapat di dalam bahan mentah itu dianiaya dengan penyerahan produk ke proses perindustrian yang disebutkan di atas. Demikian pula, dalam contoh klinik seperti najis, strain mungkin lemah jika mereka datang dari pesakit yang telah dirawat dengan antibiotik..

Oleh itu, apa-apa sampel di mana kehadiran Salmonella disyaki pra-diperkaya dalam sup laktosa, dan seterusnya diperkaya dalam selenite untuk mengoptimumkan pemulihan terpilih, seperti SS media agar agar xylose, lysine deoxycholate (XLD ), agar-agar Hekten agar (HE) dan agar-agar hijau terang, antara lain.

Sown

Untuk sampel tinja, ambil 1 g sampel dan gantungkan dalam tiub dengan 10 hingga 15 ml kaldu selenit. Sekiranya najis cair mengambil 1 ml dan larikan dalam sup. Untuk swab rektum, lepaskan bahan swab ke dalam sup.

Dalam sampel makanan pepejal mengambil 1 gr dan menggantung dalam sup selenite.

Dalam campuran makanan cecair di bahagian yang sama dengan sup selenite pada kepekatan dua kali ganda.

Untuk pemeriksaan sampel air kencing, buang supernatan itu, ambil semua sedimen dan gantungkannya dalam sup selenit.

Kaldu diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 jam inkubasi. Pertumbuhan bakteria dibuktikan oleh kekeruhan. Satu tiub tambahan bagi setiap sampel juga boleh dimasukkan ke dalam inkubasi pada suhu 42 ° C. Selanjutnya, sow media pepejal terpilih dari sup selenite.

Kawalan kualiti

Untuk mengawal kemandulan, sup selenit dari setiap batch tanpa inokulasi diinkubasi pada 37 ° C selama 24 jam. Diharapkan tidak ada kekeruhan, atau perubahan warna medium.

Untuk mengawal fungsi yang baik dalam medium, strain yang diketahui boleh digunakan, seperti:

Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028,  Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 dan Proteus mirabilis ATCC 43071.

Keputusan yang dijangka adalah:

  • Bagi ketiga-tiga strain bakteria pertama, pertumbuhan mesti memuaskan.
  • Untuk Escherichia coli perencatan separa.
  • Untuk pertumbuhan sederhana Proteus.

Had

Susu selenit sederhana adalah toksik kepada kulit manusia, oleh itu hubungan langsung harus dielakkan.

Rujukan

  1. Flores-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Hidup-Rosel M, Perancis-Monsreal J. Perbandingan media budaya natrium selenite dan natrium tetrathionate, dieram pada kedua-dua 37 ° C dan 42 ° C untuk pengasingan Salmonella najis pembawa najis. Rev Biomed 2003; 14 (4): 215-220
  2. Makmal Britania. Selenito Caldo. 2015. Boleh didapati di: britanialab.com
  3. Neogen Laboratories Sup selenito Boleh didapati di: foodsafety.neogen.com
  4. González -Pedraza J, Pereira -Sanandres N, Soto -Valela Z, Hernández -Aguirre E, Villarreal- Camacho J. Pengasingan mikrobiologi Salmonella spp. dan alat molekul untuk pengesanannya. Kesihatan, Barranquilla 2014; 30 (1): 73-94. Boleh didapati dari: http://www.scielo.org.
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Argentina.