Agar asas, penyediaan dan kegunaan BHI



The BHI agar atau Infusi Hati Utuh Brain adalah medium budaya pepejal yang berkhasiat. Dalam bahasa Sepanyol, kita merujuknya sebagai infusi jantung otak agar. Ia adalah medium budaya yang tidak selektif, yang bermaksud bahawa semua jenis bakteria Gram positif dan Gram negatif boleh dikembangkan, serta beberapa yis dan filamen kulat.

Ia terdiri daripada otak veal dan infusi jantung, hidrolyzate peptik tisu haiwan, kasein hidrolisis pankreas, natrium klorida, glukosa, natrium fosfat dan agar.

Harus diingat bahawa agar BHI adalah salah satu media kultur yang paling kerap di makmal bakteriologi. Ia boleh digunakan tanpa tambahan sebagai budaya utama, subkultur koloni yang diperolehi dalam media selektif lain atau untuk penyelenggaraan terikan di makmal.

Sebaliknya, ia adalah medium ideal untuk digunakan sebagai asas penyediaan media diperkaya, seperti agar darah dan agar coklat. Kedua-duanya ideal untuk mengasingkan mikroorganisma yang menuntut dari sudut pandangan pemakanan. Walau bagaimanapun, ia mesti diambil kira bahawa kerana ia mengandungi glukosa ia tidak mencukupi untuk memerhatikan corak hemolisis.

Begitu juga, BHI agar dapat digunakan untuk penyediaan cara khas untuk pengasingan mikroorganisme patogenik pertumbuhan yang sukar dalam media umum, di antaranya: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium diphtheriae dan Histoplasma capsulatum.

Dengan aditif BHI antibiotik menjadi medium terpilih untuk mengasingkan kulat.

Indeks

  • 1 Yayasan
  • 2 Persediaan
    • 2.1 Wedges
    • 2.2 Plat
    • 2.3 Penyediaan agar darah
  • 3 Kegunaan
    • 3.1 Gunakan tanpa tambahan
    • 3.2 Sebagai asas agar untuk penyediaan media lain
  • 4 Kawalan kualiti
  • 5 Rujukan

Yayasan

Ia adalah medium budaya yang berkhasiat untuk mengasingkan mikroorganisma yang mencabar yang sederhana, mampu meningkatkan pengayaannya dengan penambahan darah dan makanan tambahan pemakanan lain.

Ia adalah medium budaya yang tidak selektif, oleh itu ia membolehkan pertumbuhan kebanyakan bakteria Gram positif dan Gram, serta beberapa kulat. Walau bagaimanapun, ia boleh menjadi selektif dengan penambahan antibiotik.

Medium ini mengandungi infusi otak dan jantung betis, peptida hidrolisis dari tisu haiwan dan kasein hidrolisat kankreatik; semua sebatian ini bertindak sebagai sumber vitamin, asid amino, nitrogen dan karbon.

Glukosa adalah karbohidrat yang memberikan tenaga kepada mikroorganisma sebaik sahaja ia telah ditapai. Sedangkan, natrium klorida dan disodium fosfat mengekalkan keseimbangan osmosis dan memberikan pH yang dekat dengan neutral. Akhirnya, agar memberikan konsistensi padu kepada medium.

Persediaan

Berat 52 gram medium dehidrasi dan larut dalam satu liter air sulingan. Bawa campuran ke sumber panas sehingga ia mendidih, kacau sering semasa proses pembubaran.

Anda boleh menyediakan baji atau piring BHI agar tanpa tambahan.

Wedges

Untuk menyediakan persiapan baji berkhidmat untuk mengisi separuh setiap tiub, tutup dan autoklaf pada 121 ° C selama 15 minit, muncul di atas katil asas sehingga pepejal. Kemudian simpan dalam peti sejuk sehingga digunakan.

Plat

Campuran yang dilarutkan adalah diautoklikan pada suhu 121 ° C selama 15 minit, apabila ia dibiarkan sejuk hingga 50 ° C dan 20 ml medium dihidangkan dalam hidangan Petri steril. Mereka dibenarkan untuk mengukuhkan, membalikkan dan menyimpan di dalam peti sejuk sehingga ia digunakan. Benarkan plat untuk mengambil suhu bilik sebelum menanam.

PH medium hendaklah 7.4 ± 0.2.

Medium yang tidak siap adalah kuning air dan disediakan adalah ambar ringan.

Penyediaan agar darah

Selepas pensterilan sederhana, penyejukan untuk suhu kira-kira 45 hingga 50 ° C, kemudian tambah darah (50 ml), kacau perlahan-lahan dan berkhidmat untuk menyeragamkan aseptically 20 ml dalam setiap hidangan petri. Jika buih terbentuk pada plat mesti diluluskan dengan cepat pembakar api pada buih untuk menghapuskan mereka.

Begitu juga, media khas boleh disediakan dengan menambah bahan tambah yang sesuai apabila campuran mencapai suhu 45 hingga 50 ° C.

Medium adalah ceri merah.

Kegunaan

Gunakan tanpa tambahan

BHI agar tanpa bahan tambahan berguna sebagai budaya utama dan untuk menanam jenis-jenis mikroorganisma tulen yang sederhana atau sederhana yang memerlukan pengenalan kemudian.

Sebagai bermakna warna cahaya, ia adalah sesuai untuk menonton pigmen dan juga tidak mengandungi bahan-bahan yang mengganggu boleh dilakukan kepadanya beberapa ujian biokimia seperti oxidase dan catalase, atau gunung ujian biokimia yang lain dari jajahan daripada ini agar.

Begitu juga, BHI agar wedges digunakan secara meluas untuk penyelenggaraan ketegangan untuk masa yang ditentukan di makmal (bacterioteca).

Plat atau baji yang ditanam di permukaan dengan strain bakteria diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 hingga 48 jam. Walaupun, dalam kulat suhu dan masa inkubasi bergantung kepada jenis kulat yang dicari.

Sebagai asas agar untuk penyediaan media lain

Dengan asas ini boleh disediakan media diperkaya dan terpilih.

Diperkaya

Fungsi utamanya adalah untuk menjadi asas dalam penyediaan agar darah untuk kegunaan rutin dalam makmal mikrobiologi. Terutamanya, asas BHI kondusif untuk mengasingkan strain Streptococcus sp. Walau bagaimanapun, ia mempunyai kelemahan yang tidak sesuai untuk pemerhatian corak hemolisis kerana ia mengandungi glukosa.

Ia juga digunakan dalam penyediaan arnab arnab atau kuda untuk pengasingan Haemophilus sp. Untuk hasil yang lebih baik, anda boleh menambah suplemen pengayaan (IsoVitaleX).

Jika sampel datang dari saluran respirasi ke agar, bacitracin boleh ditambah untuk menghalang flora yang disertakan dan meningkatkan kebarangkalian pemulihan strain Haemophilus sp.

Sebaliknya, agar darah (kambing atau manusia) boleh disediakan dengan cystine tellurit untuk diasingkan Corynebacterium diphtheriae. Begitu juga, berguna untuk menyediakan agar darah arnab, dengan penambahan sista dan glukosa untuk pengasingan Francisella tularensis.

Pembenihan plat agar agar darah dilakukan dengan keletihan dan diinkubasi pada 35-37 ° C selama 24-48 jam dalam microaerophilic (5-10% CO)2).

Selektif

Media ini dengan penambahan antibiotik boleh menggantikan Sabouraud agar untuk pengasingan kulat.

Kombinasi BHI agar dengan chloramphenicol - gentamicin atau penisilin -, streptomycin dan darah kuda adalah ideal untuk pengasingan Histoplasma capsulatum.

Bergantung pada mikroorganisma yang terpencil, inkubasi pada 35-37 ° C atau pada suhu bilik di aerobiosis adalah disyorkan. Kadang-kadang inkubasi diperlukan dalam kedua-dua julat suhu, menggunakan 2 plat untuk ini.

Sesetengah kulat seperti Mentagrophy Trichophyton mereka perlu diinkubasi pada suhu bilik sehingga 7 hari.

Kawalan kualiti

Dari setiap kumpulan yang disiapkan, disyorkan untuk mengeruk 1 piring atau baji pada 37 ° C selama 24 jam dan mengesahkan bahawa tidak ada pertumbuhan; Terutama penting apabila menyiapkan agar darah, kerana ia adalah medium yang mudah tercemar.

Di sisi lain, kualiti medium boleh dinilai dengan mengedarkan strain piawai yang diketahui atau diperakui dan memerhatikan perkembangannya.

Dalam pengertian ini, untuk menilai BHI supaya tanpa bahan tambahan, strain Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 atau Candida albicans ATCC 10231. Mereka diinkubasi pada suhu 37 ° C dalam aerobiosis selama 24 hingga 48 jam. Dalam semua keadaan, jangkaan pertumbuhan yang memuaskan.

Untuk menilai plat agar darah, strain  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 atau Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.

Strain bakteria diinkubasi pada suhu 37 ° C dalam mikroaerophilicus selama 24 jam, manakala kulat diinkubasi pada suhu bilik di ruang lembap sehingga 7 hari. Dalam semua keadaan, jangkaan pertumbuhan yang memuaskan.

Rujukan

  1. Makmal Britania. Penyerapan jantung otak Agar. 2015. Boleh didapati di: britanialab.com.
  2. BD Laboratories Infusi Jantung Otak (BHI) Agar. 2013. Boleh didapati di: bd.com.
  3. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories, S.A. Brain Heart Infusion Agar. 2009.
  4. Makmal Neogen. Brain Heart Infusion Agar. Boleh didapati di: foodsafety.neogen.com
  5. Gil M. Agar darah: asas, kegunaan dan penyediaan. 2018. Boleh didapati di: lifeder.com.
  6. Penyumbang Wikipedia. Infusi jantung otak Wikipedia, Ensiklopedia Percuma. 19 September, 2018, 03:58 UTC. Boleh didapati di: wikipedia.org. Diakses pada 2 Mac, 2019.
  7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Argentina.