Cetrimida agar asas, penyediaan, kegunaan



The cetrimide agar atau cetrimide adalah medium budaya pepejal terpilih, yang direka untuk pengasingan Pseudomonas aeruginosa. Ia adalah berdasarkan kepada penonjolan pengeluaran ciri-ciri pigmen spesies ini dan telah dibangunkan daripada pengubahsuaian Tech agar dicipta oleh Raja, Ward dan Raney.

Rumusan asal mengandungi garam magnesium klorida, kalium sulfat, pencernaan gelatin pankreas dan agar-agar. Pengubahsuaian formula terdiri daripada penambahan cetrimide (cetyl trimethyl ammonium bromide) dan gliserol.

Cetrimide agar berguna untuk kajian mikrobiologi sampel di mana kehadiran Pseudomonas aeruginosa. Perlu diingat bahawa bakterium ini sangat penting, kerana walaupun ia adalah sebahagian dari mikrobiota alam sekitar biasa, ia sering berperilaku seperti patogen oportunistik..

Oleh itu, salah satu masalah yang paling biasa yang disebabkan oleh kuman ini adalah jangkitan nosokomial, iaitu, yang berlaku di dalam persekitaran hospital, menyerang pesakit yang mempunyai sistem imun yang tertekan..

Selain itu, disebabkan pertalian organisma ini dengan kelembapan, putih pencemaran lebih terdedah mereka: bernafas peralatan, ubat-ubatan, nebulizers, air pancut air, penghawa dingin, kuman, penyelesaian sabun, penyelesaian suntikan, luka terbuka , kateter, kateter kencing, dan lain-lain.

Dalam pengertian ini, agar cetrimide berguna untuk melakukan kawalan mikrobiologi dan tanaman kepada unsur-unsur yang dinamakan sebelumnya.

Indeks

  • 1 Yayasan
    • 1.1 Tafsiran
  • 2 Persediaan
  • 3 Kegunaan
  • 4 dibiakkan
  • 5 Had
  • 6 Kawalan kualiti
  • 7 Rujukan

Yayasan

Cetrimide agar berdasarkan kemampuan medium untuk mempromosikan pertumbuhan P. aeruginosa, merangsang pengeluaran pigmen mereka dan seterusnya menghalang pertumbuhan mikroorganisma lain.

Ciri-ciri ini adalah disebabkan oleh fungsi yang setiap komponennya memenuhi. Peptone gelatin berfungsi sebagai sumber nitrogen, vitamin dan mineral. Glycerol atau gliserin berfungsi sebagai sumber karbon.

Untuk bahagiannya, cetrimide (cetyl trimethyl ammonium bromide) adalah bahan yang menghalang pertumbuhan bakteria lain daripada P. aeruginosa, termasuk spesies lain yang dimiliki oleh genus yang sama.

Inhibisi berlaku kerana cetramide bertindak sebagai detergen kationik, menjejaskan membran plasma kebanyakan bakteria, dengan pengecualian P. aeruginosa dan beberapa orang lain yang berjaya bertahan.

Sebaliknya, ia mengandungi magnesium klorida dan kalium sulfat. Komponen ini merangsang ungkapan fenotip yang berkaitan dengan keupayaan Pseudomonas aeruginosa menghasilkan pelbagai pigmen, di antaranya: pyocyanin, pioverdin, piorubin, piomelanin dan fluorescein. Akhirnya, ia mengandungi agar-agar, yang memberikannya konsisten padat.

Tafsiran

Tafsiran pertumbuhan yang diperolehi dalam agar ini dibuat dengan cara berikut:

Memerhati, licin, jajahan bulat dengan tepi biasa, menghasilkan pigmen biru-hijau, hijau, coklat atau merah, pelepasan bau lebih buah-buahan (aminoacetophenone), adalah hasil andaian kehadiran bakteria ini dalam sampel berkata.

Sebaliknya, ia menunjukkan P. aeruginosa pemerhatian pigmen kekuningan hijau terang pada koloni apabila plat terdedah kepada cahaya ultraviolet.

Perlu diperhatikan bahawa setiap warna diperhatikan adalah disebabkan oleh pengeluaran pigmen tertentu. Pigmen biru-hijau sepadan dengan pyocyanin pengeluaran, untuk pyoverdin hijau, merah untuk piorrubina, coklat ke piomelanina kehijauan dan pendarfluor kuning-terang di bawah cahaya ultraungu untuk fluorescein.

Persediaan

Letakkan 43 g medium dehidrasi dan larut dalam air sulingan. Tambah 10 ml gliserol. Ambil campuran ke sumber haba. Biarkan mendidih selama beberapa minit sehingga pembubaran selesai.

Autoklaf pada 121 ° C selama 15 minit. Biarkan berdiri dan berkhidmat dalam hidangan petri steril apabila suhu sekitar 50 ° C.

Benarkan untuk mengukuhkan, membalikkan, memerintahkan dalam plak dan simpan di dalam peti sejuk sehingga digunakan. Untuk menanam plat agar agar, mereka harus dikeluarkan dari peti sejuk terlebih dahulu dan dibenarkan untuk mengambil suhu bilik..

PH akhir medium hendaklah 7.2 ± 0.2.

Warna medium yang kering adalah krim dan penyediaan berwarna putih.

Kegunaan

Cetrimide agar boleh digunakan untuk menanam semua jenis sampel di mana kehadiran Pseudomonas aeruginosa. Oleh itu, ia berguna dalam semua bidang mikrobiologi (alam sekitar, industri, klinikal, air dan makanan).

Ia adalah sangat penting untuk menganalisis persekitaran hospital dan dapat memohon pembetulan pengantara, kerana mikroorganisma ini mencapai pesakit melalui peralatan, ubat-ubatan, penyelesaian dan input tercemar digunakan oleh pesakit.

Dengan cara ini, mikroorganisma boleh menjangkiti saluran pernafasan yang lebih rendah, saluran kencing dan luka pesakit imunosupresi.

Kiraan koloni juga boleh dibuat P. aeruginosa dalam ujian had mikroba.

Sown

Cetrimide agar boleh digunakan sebagai budaya utama. Plat disuntik di salah satu pinggirnya dan dari sana ia diagihkan oleh keletihan ke seluruh plat. Contoh cecair boleh disemai di permukaan dengan spigula drigalski.

Plat diinkubasi dalam aerobiosis pada suhu 37 ° C selama 24 jam inkubasi.

Had

-Sebilangan kecil jenis strain  Pseudomonas aeruginosa tidak menghasilkan pyocyanin, jadi anda boleh mentafsirkan negatif palsu.

-Sesetengah spesies Pseudomonas yang mempunyai kepentingan klinikal dihalang dalam medium ini.

-Walaupun memerhati ciri-ciri yang digambarkan untuk Pseudomonas aeruginosa, mereka mesti disokong dengan ujian pengenalan tambahan. Ujian yang tidak boleh hilang adalah ujian oksidase, ia mestilah positif.

-Sesetengah enterobakteria boleh berkembang dalam medium ini dan mengembangkan pigmen kuning, tetapi ia berbeza Pseudomonas aeruginosa di mana apabila menundukkan plat ke cahaya ultraviolet tidak ada pendarfluor.

-Serratia marcescens berjaya mengembangkan dan menghasilkan pigmen merah jambu.

-Sekiranya plak yang dibangkitkan dengan agar cetrimide terdedah untuk suatu masa pada suhu bilik, strain P. aeruginosa mereka boleh kehilangan pendarfluor yang diamati di bawah cahaya ultraviolet, namun harta itu pulih jika ia diinkubasi semula pada suhu 37 ° C.

Kawalan kualiti

Untuk menguji fungsi yang tepat agar agar cetrimide, strain kawalan boleh digunakan, seperti: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 dan Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Keputusan yang dijangka adalah:

  • Untuk P. aeruginosa pertumbuhan yang baik, dengan pigmen biru kehijauan dan fluorescein positif.
  • S. maltophilia dan S. aureus akan menjadi sebahagian atau sepenuhnya menghalang.
  • Ia dijangkakan bahawa Escherichia coli benar-benar menghalang.

Rujukan

  1. Callicó A, B Cedre, Sifontes S, Torres V, Pino Dan Callis A, Esnard S. fenotip pencirian dan pencilan klinikal serologi daripada Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
  2. Makmal Conda Pronadisa. Asas agar cetrimide. 2014. Boleh didapati di: condalab.com
  3. Makmal Britania. Cetrimida agar. 2015. Boleh didapati di: britanialab.com
  4. BD Laboratories BD Pseudosel agar (Cetrimide agar). 2013. Boleh didapati di: bd.com
  5. Makmal Francisco Soria Melguizo, C.A. Cetrimide agar. 2009. Boleh didapati di: http://f-soria.es