MacConkey Agar asas, penyediaan dan kegunaan



The MacConkey agar Ia adalah medium budaya pepejal yang membolehkan pengasingan eksklusif bacaan negatif Gram. Oleh sebab itu ia adalah medium yang selektif dan juga membezakan antara bakteria lactose fermentasi dan tanpa fermentasi, yang menjadikannya medium perbezaan. Ia adalah salah satu media budaya yang paling banyak digunakan dalam makmal mikrobiologi.

Media ini digunakan terutamanya untuk pengasingan bacaan negatif Gram milik keluarga Enterobacteriaceae, termasuk spesies oportunistik dan enteropatogenik.

Ia juga boleh digunakan untuk mengasingkan bakteria enterik lain yang menghuni saluran pencernaan, tetapi tidak termasuk Enterobacteriaceae, sebagai Aeromonas sp, Plesiomonas sp, antara lain.

Akhirnya, ia boleh mengasingkan bakteria glukosa gram negatif yang lain, yang terdapat dalam alam sekitar, air atau tanah, tetapi kadang kala boleh menjadi patogen oportunis seperti Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alkaline sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, antara lain.

Indeks

  • 1 Yayasan
    • 1.1 MacConkey Agar
  • 2 Persediaan
  • 3 Kegunaan MacConkey konvensional
  • 4 Varian lain dari MacConkey agar
    • 4.1 MacConkey agar dengan sorbitol
    • 4.2 MacConkey Agar tanpa ungu kristal, atau garam
    • 4.3 MacConkey agar dengan cefoperazone
    • 4.4 MacConkey Agar disediakan dengan 10% air laut v / v
  • 5 Rujukan

Yayasan

MacConkey Agar

Asas media ini dapat dijelaskan melalui perihalan komponennya, karena masing-masing mempunyai tujuan yang menentukan suatu harta itu.

Garam hempedu dan kristal ungu

Dalam pengertian ini, MacConkey agar mempunyai komposisi kompleks. Pertama sekali ia mengandungi garam hempedu dan kristal ungu.

Unsur-unsur ini bertanggungjawab untuk menghambat pertumbuhan bakteria Gram-positif dan beberapa bakteria Gram-negatif yang menuntut. Sebaliknya, ia sesuai untuk pembangunan bakteria Gram negatif yang tidak terjejas oleh bahan-bahan ini. Itulah sebabnya ia adalah medium yang selektif.

Ia dikatakan sedikit selektif berbanding dengan media lain yang juga menghalang pertumbuhan bakteria Gram-positif dan juga kebanyakan bakteria Gram-negatif.

Ia sangat selektif untuk genus tertentu, seperti TCBS agar untuk pengasingan Vibrio cholerae dan lain-lain jenis halophilic dan alkaloid yang serupa.

Peptone, polipetik dan laktosa

Mengandungi bahan yang menyediakan nutrien yang diperlukan untuk mikroorganisma yang berkembang dalam medium ini, seperti peptones, polipectones dan laktosa.

Laktosa adalah titik utama bagi medium untuk menjadi medium perbezaan, kerana mikroorganisma yang mempunyai keupayaan untuk menapai laktosa akan membangun koloni merah jambu yang kuat.

Sesetengah bakteria boleh menapai laktosa perlahan atau lemah, membangunkan koloni merah jambu pucat dan kekal laktosa positif.

Mereka yang tidak menangkap laktosa menggunakan peptone sebagai sumber tenaga, menghasilkan amonia, alkali medium. Oleh itu, koloni yang berasal tidak berwarna atau telus.

Penunjuk PH

Perubahan warna dicapai melalui sebatian penting lain yang mempunyai MacConkey agar. Kompaun ini adalah penunjuk pH, yang dalam kes ini adalah merah neutral.

Penapaian laktosa menjana pengeluaran asid campuran. Mereka menghasut ke medium pada pH di bawah 6.8..

Ini menyebabkan penunjuk pH beralih ke arah warna merah jambu yang sengit. Keamatan warna mungkin berbeza-beza bergantung kepada pH akhir.

Air suling, natrium klorida dan agar

Sebaliknya, ia mengandungi air suling dan natrium klorida yang memberikan hidrasi dan keseimbangan osmosis kepada medium. Akhirnya, medium mengandungi agar, yang merupakan asas yang menyediakan konsistensi medium padat.

Medium agar agar MacConkey yang disediakan mesti mempunyai pH akhir yang diselaraskan kepada 7.1 ± 0.2..

Persediaan

Untuk satu liter MacConkey agar, 50 g medium dehidrasi perlu ditimbang, kemudian diletakkan di dalam fiola dan dibubarkan dalam satu liter air sulingan. Selepas 10 minit berehat, dipanaskan dengan mencampurkan secara berterusan sehingga ia mendidih selama 1 minit.

Kemudian letakkan fiola dalam autoklaf dan sterilkan pada 121 ° C selama 20 minit. Pada akhir masa, ia dikeluarkan dari autoklaf dan dibiarkan sejuk hingga suhu 45 ° C, kemudian diservis dalam hidangan petri steril di dalam hud aliran laminar atau di hadapan pembakar Bunsen..

Benarkan mengukuhkan dan simpan dalam pemegang plat terbalik dan disejukkan pada suhu 2-8 ° C sehingga digunakan.

Untuk mendapatkan agar MacConkey yang menghalang kesan swarning yang dihasilkan oleh genus Proteus, garam MacConkey agar yang rendah digunakan..

Penggunaan kon MacConkey konvensional

MacConkey agar dimasukkan ke dalam semua set media kultur yang disusun untuk menyemai sampel klinikal yang diterima di makmal. Ia juga berguna dalam mikrobiologi makanan dan mikrobiologi alam sekitar.

Berbagai bakteri negatif Gram yang tumbuh di dalam medium ini mengekspresikan ciri-ciri fenotipik yang membantu diagnosis anggapan spesies yang dimaksud. Sebagai contoh, saiz, warna, konsisten dan bau koloni adalah beberapa ciri yang boleh dibimbing.

Dalam persekitaran ini, spesies Escherichia coli, Klebsiella sp dan Enterobacter sp menghasilkan koloni merah jambu yang kuat, dikelilingi oleh kawasan empedu yang terdedah.

Sebanyak bakteria sebagai Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp dan Hafnia sp mereka boleh muncul tanpa warna selepas 24 jam atau merah jambu pucat dalam 24 -48 jam.

Begitu juga, genera Proteus, Edwadsiella, Salmonella dan Shigella menghasilkan koloni tidak berwarna atau telus.

Varian lain dari MacConkey agar

Ada varian MacConkey agar lain yang mempunyai tujuan tertentu. Seterusnya mereka disebutkan:

MacConkey agar dengan sorbitol

Media ini direka untuk membezakan ketegangan enteropatogenik (Escherichia coli enterohemorrhagic O157: H7) daripada selebihnya daripada strain Escherichia coli.

Media ini mengubah laktosa karbohidrat untuk sorbitol. The strains of E. coli enterohaemorrhagic O157: H7 berbeza dari selebihnya kerana mereka tidak menanam sorbitol dan oleh itu koloni telus diperolehi, namun selebihnya strain E. coli jika mereka menanam sorbitol dan koloni adalah merah jambu yang kuat.

MacConkey Agar tanpa ungu kristal, atau garam

Agar ini berbeza jauh daripada agar MacConkey klasik, kerana ia tidak mempunyai kristal violet, bakteria Gram-positif boleh tumbuh.

Sebaliknya, ketiadaan garam menghalang penampilan swarming di agar yang dihasilkan oleh beberapa bakteria enterik, seperti genus Proteus, dan dengan itu memudahkan pengasingan semua bakteria yang ada, termasuk bakteria Gram-positif.

MacConkey agar dengan cefoperazone

Varian MacConkey agar direka bentuk untuk mula mengasingkan Laribacter hongkongensis dan kemudian mereka menyedari bahawa ia berguna untuk pengasingan Arcobacter butzleri. AKedua-duanya adalah sedikit melengkung Gram bacilli negatif terhadap cefoperazone.

Bakteria ini baru-baru ini dikaitkan sebagai penyebab gastroenteritis dan cirit-birit yang diperolehi di kalangan individu Asia dan Eropah, yang muncul sebagai dua patogen yang baru muncul.

Antibiotik membolehkan menghalang flora yang menyertai saluran pencernaan, yang memihak kepada perkembangan bakteria ini, menghalang mereka daripada menjadi tidak disedari, kerana mereka memerlukan 72 jam untuk berkembang.

MacConkey Agar disediakan dengan 10% air laut v / v

Varian ini berguna untuk penilaian petunjuk kesihatan bakteria pencemaran tahi, termasuk jumlah coliform dan coliform fecal dalam perairan salin rekreasi (pantai dan teluk).

Cortez et al. 2013 menunjukkan bahawa medium yang disediakan dengan cara ini dengan ketara meningkatkan pemulihan mikroorganisma ini dalam persekitaran salin, berbanding penggunaan MacConkey agar yang disediakan dengan air sulingan..

Ini adalah kerana medium yang diubahsuai merangsang pertumbuhan bakteria yang secara fisiologi dalam keadaan dorman "berdaya maju tetapi tidak ditanam", oleh itu ia tidak boleh didapatkan semula dalam media konvensional.

Rujukan

  1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et al. Penggunaan cefoperazone MacConkey agar untuk pengasingan terpilih Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
  2. "MacConkey Agar." Wikipedia, ensiklopedia percuma. 4 Apr 2018, 18:16 UTC. 29 Dis 2018, 15:22 en.wikipedia.org
  3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Argentina Panamericana S.A Editorial.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologi. (Edisi ke-5). Argentina, Editorial Panamericana S.A..
  5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Kesan media kebudayaan yang disediakan dengan air laut pada petunjuk kesihatan di perairan laut spa Chichiriviche, negara Falcón, Venezuela. Rev Soc Mari Microbiol 2013; 33: 122-128
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Mikrobiologi klinikal praktikal. University of Cadiz, edisi ke-2. Perkhidmatan Penerbitan UCA.