Agar asas garam dan manitol, penyediaan dan kegunaan



The garam agar dan manitol atau mannitol asin adalah medium budaya pepejal, terpilih dan berbeza. Ia dicipta oleh Chapman untuk mengasingkan cocci Gram positif patogen, terutamanya Staphylococcus aureus.

Walau bagaimanapun, ia juga berguna untuk mengasingkan Staphylococcus epidermidis, yang kadang kala ada sebagai patogen oportunistik, dan Staphylococcus saprophyticus, patogen kencing diiktiraf, antara spesies lain.

Sesetengah Enterococcus mampu berkembang dalam medium ini, serta bakteria pembentukan spora positif tertentu.

Media ini sangat berguna dalam analisis sampel klinikal, tetapi juga digunakan dalam kajian mikrobiologi makanan dan kawalan mutu produk perindustrian, seperti kosmetik, ubat-ubatan, dan lain-lain..

Mannitol masin salutan terdiri daripada ekstrak dan pepton daging lembu, triptein, manitol, natrium klorida, phenol merah dan agar.

Indeks

  • 1 Yayasan
  • 2 Persediaan
  • 3 Kegunaan
  • 4 Kawalan kualiti
  • 5 pertimbangan akhir
  • 6 Rujukan

Yayasan

Mannitol agar bersesuaian dengan kepekatan garam yang tinggi. Salinitas bertindak sebagai bahan penghalang dan menghalang pertumbuhan bakteria Gram-negatif.

Ia juga berbeza kerana kehadiran karbohidrat mannitol dan penunjuk pH merah fenol. Dari ini, bakteria yang mampu menanam manitol memproduksi asid, mengasapi medium, mengubah koloni dan kuning sederhana.

Sebaliknya, koloni yang tidak menanam manitol tumbuh dalam medium yang mengambil nutrien yang disediakan oleh ekstrak dan peptonas daging dan tripteína. Dari situ, bakteria mengekstrak karbon, nitrogen, vitamin dan mineral yang diperlukan untuk pertumbuhan mereka.

Tanah jajahan dalam kes ini mungkin merah jambu atau merah jambu yang kuat, dan mediumnya tetap sama warna atau perubahan kepada fuchsia.

Agar adalah bahan yang memberikan konsistensi kepada medium.

Persediaan

Untuk menyediakan satu liter mannitol agar agar, 111 g medium dehidrasi rumah komersial keutamaan ditimbang dan dibubarkan dalam 1000 ml air suling, menggunakan fiola.

Haba digunakan dengan kerap mengeluarkan media untuk memperbaiki proses pembubaran. Biarkan ia mendidih sebentar.

Letakkan fiola dalam autoklaf pada 121 ° C selama 15 minit.

Pada akhir masa, fiola dikeluarkan dari autoklaf, dibenarkan berdiri dan diservis antara 15 dan 20 ml pada hidangan petri steril apabila suhu kira-kira 50 hingga 55 ° C.

Ia dibenarkan untuk mengukuhkan, memerintahkan dalam bentuk terbalik dalam plaqueros dan menyimpan dalam peti sejuk sehingga penggunaannya. Sebelum menanam sampel, anda mesti menunggu plat untuk mengambil suhu persekitaran.

Plat disemai oleh tunggul atau dengan menyemai di permukaan dengan spatula drigalski. PH akhir medium yang disediakan haruslah 7.4 ± 0.2

Warna medium dehidrasi adalah cahaya kuning air dan warna medium yang disediakan adalah oren merah.

Kegunaan

Oleh kerana selektiviti yang tinggi, medium ini sesuai untuk menanam sampel dengan flora campuran di mana seseorang ingin mencari kehadirannya Staphylococcus aureus, sebagai patogen utama genus ini.

Dalam pengertian ini, salah satu kegunaan paling kerap ialah dalam analisis mikrobiologi sampel exudate pharyngeal dan pelepasan hidung, terutamanya untuk mengesan pembawa asymptomatic S. aureus.

Beberapa negara telah melaksanakan analisis ini sebagai keperluan wajib bagi orang yang ingin bekerja sebagai penjual makanan.

Kawalan ini menghalang pengambilan orang yang pembawa S. aureus, dengan itu mengelakkan keracunan makanan secara besar-besaran, kerana penggunaan makanan yang tercemar dengan enterotoxin staphylococcal.

Ia juga boleh dimasukkan dalam pembumian jangkitan luka, budaya darah, CSF, bronchoalveolar lavage, antara lain..

Mannitol agar masin berguna untuk mengasingkan kembali koloni kencing air dari agar CLED atau agar darah yang mana Gram telah menunjukkan cocci Gram-positif dalam kelompok.

Ia juga sah dalam analisis mikrobiologi makanan, air minuman, tanah, antara aplikasi lain.

Kawalan kualiti

Sebaik sahaja sekeping plat dengan mannitol masin yang disediakan, adalah dinasihatkan untuk menjalankan kawalan kualiti. Strain kawalan disemai untuk menunjukkan jika ada pertumbuhan atau tidak.

Sebagai kawalan positif, strain dikenali Staphylococcus aureus. Ia mesti berkembang dengan memuaskan dengan membangun koloni kuning, dan medium juga menjadi warna yang sama.

Begitu juga, mudah untuk memasukkan ketegangan yang diketahui Staphylococcus epidermidis. Ia mesti berkembang dengan memuaskan dengan membangun koloni merah jambu, dan medium ini tetap warna yang sama atau gelap dalam warna merah jambu yang lebih kuat.

Sebagai kawalan negatif, strain digunakan yang tidak boleh berkembang dalam medium ini. Sebagai contoh, anda boleh menanam ketegangan yang diketahui Escherichia coli atau Klebsiella pneumoniae. Hasil yang diharapkan adalah penghalang yang lengkap, iaitu, tidak ada pertumbuhan.

Di samping itu, plat tanpa inokulasi perlu diinkubasi. Di dalamnya tidak ada pertumbuhan, tiada perubahan warna.

Adalah penting bahawa plat tidak digunakan jika terdapat tanda-tanda kemerosotan, seperti pencemaran, dehidrasi, perubahan warna, dan lain-lain..

Pertimbangan terakhir

Apabila menggunakan mannitol agar agar sederhana, beberapa aspek penting perlu dipertimbangkan:

-Mendapatkan pertumbuhan koloni kuning tidak menunjukkan bahawa ia adalah Staphylococcus aureus. Perlu diingati bahawa beberapa jenis Enterococcus mampu berkembang dalam medium dan mannitol fermentasi ini, serta bacilli pembentukan spora positif tertentu..

Oleh itu, adalah penting untuk melakukan Gram ke koloni dan ujian katalase.

-Sebaliknya, ia mesti dipertimbangkan bahawa spesies lain Staphylococcus berbeza daripada aureus Mereka juga mampu menanam manitol. Oleh itu, adalah penting untuk sub-menanam tanah jajahan untuk sup makanan nutrien untuk mengambil dari sana dan melakukan ujian koagulase.

Antara spesies klinikal Staphylococcus yang penting untuk lelaki yang menanam manitol ialah: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, antara lain.

Lain-lain boleh memberi tindak balas pemboleh ubah, iaitu, kadang-kadang positif dan kadang-kadang negatif. Ada yang S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, antara lain.

-Ia tidak disyorkan untuk mengambil koloni secara langsung dari mannitol agar untuk melaksanakan ujian koagulase, kerana kepekatan garam yang tinggi dalam medium boleh mengganggu hasilnya.

-Akhir sekali, adalah disyorkan untuk mengukuhkan plat yang dijadikan benih dengan mannitol asin sehingga 48 jam, kerana fakta bahawa beberapa jenis S. aureus Mereka boleh menanam perlahan-lahan mannitol, walaupun ini tidak terlalu kerap.

Rujukan

  1. Makmal Britania. Mannitol agar agar. 2015. Boleh didapati di: britanialab.com
  2. "Mannitol Agar Salted". Wikipedia, ensiklopedia percuma. 31 Okt, 2018, 19:08 UTC. 17 Jan 2019, 20:55, boleh didapati di: en.wikipedia.org.
  3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologi. (Edisi ke-5). Argentina, Editorial Panamericana S.A..
  4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Argentina Panamericana S.A Editorial
  5. BD Laboratories BD Mannitol Salt Agar. 2013. Boleh didapati di: bd.com.