Agar Salmonella-Shigella asas, penyediaan dan kegunaan



The Salmonella-Shigella agar juga ia dikenali sebagai SS agar merupakan medium sederhana terpilih dan berbeza, terutama yang direka untuk pengasingan bakteria enteropatogenik genus Salmonella dan Shigella, kedua-dua daripada sampel alam sekitar dan klinikal.

Agar SS mempunyai komposisi kompleks; Ia terdiri daripada ekstrak daging, pepton, laktosa, garam hempedu, natrium sitrat, natrium tiosulfat, sitrat ferik, agar, merah, air hijau dan suling cemerlang neutral. Memandangkan kepelbagaiannya yang besar, adalah mungkin untuk menanam sampel dengan flora campuran yang banyak.

Di makmal mikrobiologi, medium Salmonella-Shigella digunakan secara meluas untuk menyiasat kehadiran Salmonella dan Shigella dalam contoh-contoh tinja diare, kumbahan, air minuman dan makanan.

Kadang-kadang perlu menggunakan kuah pre-pengayaan (sup laktosa) dan pengayaan (selenite cystine sup) untuk memulihkan strain Salmonella.

Langkah-langkah ini diperlukan apabila kewujudan Salmonella disyaki dalam kuantiti yang sangat rendah, atau di mana ketegangan itu boleh diabaikan oleh proses-proses yang khas pengeluaran perindustrian, terutamanya makanan yang diproses. Ia juga dinasihatkan untuk memperkayakan sampel najis dari pesakit yang telah dirawat dengan antibiotik.

Selepas itu, sup pengayaan boleh pertempatan agar Salmonella Shigella dan cara-cara lain yang serupa, seperti xylose agar, lysine deoxycholate (XLD) agar dan Hektoen enterik (HE).

Indeks

  • 1 Yayasan
    • 1.1 Kuasa pemakanan
    • 1.2 Konsistensi
    • 1.3 Selektif
    • 1.4 Berbeza
  • 2 Persediaan
  • 3 Gunakan
  • 4 Had
  • 5 Kawalan kualiti
  • 6 Rujukan

Yayasan

Setiap komponen medium budaya Salmonella-Shigella mempunyai fungsi tertentu, dan campuran secara keseluruhannya memberikan sifat-sifat yang mencirikannya.

Kuasa berkhasiat

ekstrak daging dan pepton (kasein mencerna dan tisu haiwan) membekalkan nutrien yang diperlukan (nitrogen, karbon dan vitamin) untuk pembangunan mikroorganisma mampu bertolak ansur dengan komponen lain.

Ketekalan

Agen agar-agar bertanggungjawab menyediakan konsistensi padu kepada medium.

Selektif

Media ini sangat selektif kerana ia mengandungi garam hempedu, natrium sitrat dan hijau terang. Oleh itu, ia menghalang pertumbuhan semua bakteria Gram-positif dan kebanyakan bakteria Gram-negatif, termasuk beberapa koliform.

Walaupun bakteria daripada genus Salmonella dan beberapa jenis Shigella menyokong bahan ini.

Terutamanya, genus Salmonella sangat tahan terhadap garam hempedu, sehingga mereka dapat hidup di pundi hempedu beberapa pesakit pembawa yang sentiasa mengusir bakteria melalui najis.

Pembezaan

Laktosa adalah karbohidrat yang boleh dibezakan yang membantu membezakan strain fermentasi laktosa dari strain bukan fermentasi. Harta ini dibuktikan dengan adanya penunjuk pH, yang dalam medium ini adalah fenol merah.

Strain fermentasi laktosa memberikan koloni merah, manakala strain bukan fermentasi tidak berwarna. Ciri ini penting, kerana Salmonella dan Shigella tidak menapai laktosa.

Sebaliknya, medium ini mengandungi natrium thiosulfate sebagai sumber sulfur dan sitrat ferrilik sebagai sumber besi. Kedua-dua sebatian ini dapat membezakan bakteria yang mampu menghasilkan hidrogen sulfida. Ini bertindak balas untuk membentuk endapan hitam yang tidak larut dan kelihatan ferit sulfida.

Harta ini mempunyai beberapa jenis genus Salmonella. Biasanya koloni mereka tidak rata dengan titik hitam di tengahnya. Salmonella yang lain tidak menghasilkan H2S dan berkembang sebagai koloni berwarna.

Sebaliknya, koloni genus Shigella tidak berwarna tanpa rata.

Persediaan

Ini bermakna sangat mudah untuk disediakan.

Berat 63 gr medium komersial kering dan larut dalam satu liter air sulingan. Panaskan penyelesaian dan kacau. Campuran boleh mencapai mendidih sehingga beberapa minit.

Media ini tidak boleh autoclave. Selepas pembubarannya disampaikan secara langsung pada plat steril tunggal atau double.

Apabila menyejukkan, mereka disusun dengan cara terbalik dalam pembuat plak dan disimpan dalam peti sejuk (2-8 ° C) sehingga mereka digunakan.

Medium selepas penyediaan harus pH 7.2 ± 0.2 dan merah jingga.

Adalah penting untuk membolehkan plat menjadi marah sebelum menyemai sampel. Anda boleh secara langsung biji sampel asal, menyalurkan bahan pada sebahagian daripada agar dan kemudian dari sana striate oleh keletihan.

Sekiranya menggunakan sup diperkayakan, lulus sebahagian daripada sup selenite dan sow dengan spigula drigalski.

Inkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 jam dalam aerobiosis.

Perlu diingat bahawa jumlah gram untuk menimbang dan pH akhir medium boleh berbeza dari satu rumah komersial ke yang lain. Plat dasar medium sentiasa membawa petunjuk untuk penyediaannya.

Guna

Ia sering digunakan dalam analisis kultur tinja dan dalam kajian mikrobiologi sampel air sisa, air minuman dan makanan.

Selalunya plat double disediakan, di satu sisi Salmonella-Shigella agar diletakkan dan di bahagian lain XLD agar.

Had

-Sesetengah strain Shigella tidak berkembang dalam medium ini. Oleh itu, ia tidak disyorkan untuk pengasingan utama genus ini.

-Tidak semua koloni yang jelas dengan pusat hitam menandakan Salmonella; Ujian biokimia mesti dilakukan untuk membuat pengenalan yang betul, kerana koloni beberapa jenis Proteus tidak dapat dibezakan daripada orang-orang Salmonella.

-Media dehidrasi perlu berhati-hati terhadap pendedahan kepada alam sekitar, kerana ia sangat menyerap. Oleh itu, ia mesti disimpan di persekitaran yang kering dan tertutup. Dibuka untuk tempoh yang sangat pendek.

-Dari masa ke masa garam hempedu dalam medium boleh mendakan, membentuk imej yang mirip dengan mats dalam agar, tetapi ini tidak menjejaskan keputusan.

-Sesetengah strain Shigella perlahan-lahan boleh menapai laktosa.

Kawalan kualiti

Untuk membuktikan bahawa medium bekerja dengan betul, adalah dinasihatkan untuk menanam strain kawalan yang dikenali atau diperakui dan memerhatikan jika pertumbuhan memenuhi ciri-ciri yang diharapkan.

Untuk tujuan ini, keturunan E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium o Enterococcus faecalis.

Keputusan yang dijangka adalah:

Escherichia coli --koloni cembung merah jambu.

Enterobacter dan Klebsiella- koloni besar dan mucoid merah atau merah jambu.

Shigella flexneri --koloni rata yang jelas atau tidak berwarna.

Salmonella typhimurium - koloni tanpa warna dengan pusat hitam.

Enterococcus faecalis-- jumlah perencatan.

Rujukan

  1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Salmonella-Shigella agar. 2009. Boleh didapati di: f-soria.es
  2. Makmal BD. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Boleh didapati di: bd.com
  3. Makmal Britania. Salmonella-Shigella Agar. 2015. Boleh didapati di: britanialab.com
  4. Diagnostik Valtek. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar) .2010. Boleh didapati di: andinamedica.com
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Argentina.
  6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologi. Ed ed. Editorial Panamericana S.A. Argentina.