So asas agar asas, penyediaan dan kegunaan triptisinya



The trypticasein soy agar atau soya soya trypticase adalah medium budaya yang padat, tidak terpilih dan berkhasiat. Ia ditetapkan dengan huruf TSA untuk akronimnya dalam Bahasa Inggeris Trypticase Soy Agar. Ia terdiri daripada triptein, soya peptone, natrium klorida dan agar-agar.

Oleh kerana kuasa berkhasiat tinggi, ia sesuai untuk penanaman mikroorganisma yang sederhana dan menuntut. Sederhana tanpa suplemen tambahan tidak digalakkan untuk budaya utama, tetapi amat berguna untuk strain disubkulturkan dan menjaga mereka yang berdaya maju tulen, antara kegunaan lain.

Juga, agar ini berfungsi sebagai asas penyediaan media diperkayakan seperti agar darah, terutama apabila diperlukan untuk memerhatikan corak hemolisis dan untuk melancarkan taksonomi optoquine dan bacitracin, yang diperlukan dalam diagnosis Streptococcus pneumoniae dan Streptococcus pyogenes masing-masing.

Lebih-lebih lagi, apabila digabungkan dengan antibiotik adalah berguna untuk mengasingkan dan ketat mikroorganisma anaerobik fakultatif kepentingan klinikal daripada sampel dengan flora bercampur.

Akhirnya, komposisi agar-agar soya triptikasein dan prestasinya memenuhi syarat-syarat yang ditetapkan oleh pharmacopoeias yang berbeza (Eropah, Jepun dan Amerika Utara).

Indeks

  • 1 Yayasan
  • 2 Persediaan
    • 2.1 Tripticasein soy agar plat
    • 2.2 Tripticasein soy agar plat ditambah dengan darah
    • 2.3 Tripticasein soy agar plat ditambah dengan darah yang dipanaskan
    • 2.4 Wedges agar soya tripticasein
  • 3 Kegunaan
  • 4 dibiakkan
  • 5 Kawalan kualiti
    • 5.1 Kawalan keupayaan
    • 5.2 Pertumbuhan pertumbuhan
    • 5.3 Kawalan pertumbuhan dan corak hemolisis soya triptikasein ditambah dengan darah
  • 6 Rujukan

Yayasan

Untuk perkembangan bakteria yang betul diperlukan kehadiran sumbangan tenaga, seperti asid amino, vitamin, asas purine dan pyrimidic.

Dalam pengertian ini, triptein dan soya peptone menyediakan nutrien ini kepada mikroorganisma, dengan itu membolehkan pembangunan penuh mereka. Walau bagaimanapun, untuk menuntut bakteria diperlukan untuk menambah agar ini dengan darah defibrinasi atau darah panas untuk meningkatkan pengayaannya.

Sebaliknya, jika antibiotik ditambah kepada medium, ia menjadi medium terpilih. Anda juga boleh menambah 0,6% ekstrak yis untuk memihak kepada spesies isolasi genus Listeria, sambil menambah telluriit cystine dan Darah kambing sangat sesuai untuknya Corynebacterium diphteriae.

Akhirnya, natrium klorida memberikan keseimbangan osmosis ke medium dan agar menyediakan konsistensi padat.

Persediaan

Tripticasein soy agar plat

Untuk mempersiapkan agar soya trypticasein, 40 gram medium komersial kering perlu ditimbang pada skala digital. Larutkan dalam satu liter air suling yang terkandung dalam fiola.

Campuran dibenarkan untuk berdiri selama 5 minit dan kemudian dibawa ke sumber panas untuk membantu pembubaran medium. Ia perlu dikeringkan dengan kerap dan dibiarkan mendidih selama 1 atau 2 minit. Selepas itu, media disterilkan dalam autoklaf pada 121 ° C selama 15 minit.

Biarkan sejuk hingga 50 ° C dan edarkan dalam hidangan Petri steril. Biarkan menguatkan, membalikkan, memerintahkan dalam plak dan simpan di dalam peti sejuk.

PH akhir medium hendaklah 7.3 ± 0.2.

Ia harus diambil kira bahawa warna medium budaya yang kering adalah cahaya kuning dan harus disimpan antara 10 hingga 35 ° C, di tempat yang kering.

Untuk bahagiannya, agar yang disediakan adalah ambar ringan. Plat yang disiapkan perlu disimpan dalam peti sejuk (2 hingga 8 ° C) sehingga digunakan.

Plat mesti mencapai suhu bilik sebelum digunakan.

Tripticasein soy agar plat ditambah dengan darah

Agar darah disediakan dengan menambah 5% darah defibrinasi pada saat penyejukan kedelai trypticasein pada 50 ° C. Campuran itu diseragamkan dengan berputar dengan pergerakan lembut.

Hidangkan dalam hidangan petri steril. Warna medium mestilah merah ceri.

Tripticasein soy agar plat ditambah dengan darah yang dipanaskan

Menyediakan asas agar darah TSA adalah perlu untuk melengkapkan prosedur yang diterangkan di atas, tetapi meninggalkan autoklaf itu dibenarkan untuk berdiri sehingga suhu sederhana adalah kira-kira 56 hingga 70 ° C. Pada masa itu darah diletakkan dan dicampur sehingga medium menjadi coklat.

Hidangkan dalam hidangan petri steril. Warna medium adalah coklat coklat.

Bubuk tahi soya triptikasein

Prosedur penyediaan agar adalah sama seperti yang diterangkan untuk plat, dengan perbezaan yang bukannya melayani medium pada hidangan Petri, ia diagihkan antara 10 dan 12 ml dalam tiub dengan penutup Bakelite sebelum sterilisasi.

Selanjutnya, tiub-tiub itu dihidupkan semula pada 121 ° C selama 15 minit. Apabila meninggalkan, mereka bersandar dengan bantuan sokongan dan membenarkan diri mereka menguatkan.

Baji yang disediakan disemai dengan permukaan dan berfungsi untuk mengekalkan mikroorganisma yang tidak menuntut tertentu, untuk waktu yang ditentukan.

Kegunaan

Trypticasein soy agar digunakan dalam kes berikut:

-Sebagai asas untuk menyediakan agar-agar darah klasik yang digunakan secara rutin dalam kebanyakan makmal.

-Pengasingan bakteria menuntut.

-Pemerhatian terhadap pola hemolisis.

-Pelaksanaan ujian diagnostik.

-Sebagai asas untuk menyediakan agar darah khas untuk Corynebacterium diphteriae, dengan cystine tellurium dan darah kambing.

-Sebagai asas untuk menyediakan agar darah kambing, lebih banyak kanamycin-vancomycin untuk pertumbuhan anaerobes, terutama Bacteroides sp.

-Untuk penyelenggaraan strain yang tidak menuntut (Bacterioteca).

-Kiraan aerobik mikrob dalam kajian batasan mikrob air sampel, persekitaran, makanan dan kosmetik.

Sown

Sampel boleh dibiji secara langsung di permukaan kedelai soya trypticasein ditambah dengan darah atau bahan tambahan lain. Ia ditaburkan oleh keletihan.

Sedangkan plat agar soya triptikasein tanpa aditif secara amnya digunakan untuk subkultur strain mikroba (bakteria atau ragi).

Kawalan kualiti

Kawalan keupayaan

Untuk menyemak kemandulan pelbagai media yang disediakan dengan asas soya agar tryptone adalah disyorkan bahawa: setiap kelompok bersedia mesti dieram 1 atau 2 plat pokok tanpa mikoriza atau tiub pada 37 ° C selama 24 jam untuk membuktikan kemandulan. Dalam semua kes, ia mesti kekal tanpa pertumbuhan.

Jika pencemaran ditemui, keseluruhan lot mesti dibuang.

Kawalan pertumbuhan

Untuk mengkaji fungsi agar soya trypticasein yang betul, strain bakteria berikut boleh digunakan: Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 dan Enterococcus faecalis ATCC 29212.

Strainnya disemai dan diinkubasi dalam aerobiosis pada 37 ° C selama 24 jam.

Dalam semua kes, pertumbuhan mesti memuaskan.

Anda juga boleh menggunakan cendawan sebagai Kompleks Candida albicans ATCC 10231 dan Aspergillus niger ATCC 16404. Pertumbuhan yang baik dijangka untuk kedua-dua strain.

Kawalan pertumbuhan dan corak hemolisis soya triptikasein ditambah dengan darah

Untuk mengesahkan fungsi darah agar siap dengan betul dengan asas ini, strain berikut boleh digunakan: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 dan Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.

Mereka disemai dan diinkubasi pada suhu 37 ° C dalam mikroaerophilicus selama 24 jam.

Dalam semua kes, pertumbuhan mesti memuaskan, dengan mengambil kira bahawa dalam S. pyogenes beta-hemolisis (halo jelas sekitar koloni) dan dalam kedua-dua jenis S. pneumoniae hemolisis alfa (halo kehijauan di sekitar koloni) harus diperhatikan.

Rujukan

  1. Penyumbang Wikipedia. Trypticase Saya agar. Wikipedia, Ensiklopedia Percuma. 17 Disember 2018, 15:47 UTC. Boleh didapati di: https://en.wikipedia.org
  2. Makmal Britania. Tryteine ​​soy agar. 2015. Boleh didapati di: britanialab.com
  3. Neogen Laboratories Triptych kedelai. Boleh didapati di: foodsafety.neogen.com
  4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Argentina Panamericana S.A Editorial.
  5. BD Laboratories Trypticase Saya Agar. 2014. Boleh didapati di: .bd.com