Asas agar hijau terang, penyediaan dan kegunaan



The agar hijau terang ia adalah medium budaya pepejal, dengan tahap pemilihan yang tinggi. Ia digunakan secara eksklusif untuk pemisahan strain genus Salmonella, namun ada beberapa pengecualian, seperti spesies typhi dan paratyphi yang tidak tumbuh dalam medium ini.

Pencarian untuk genus Salmonella sering berlaku dalam sampel najis, air atau makanan. Dalam pengertian ini, medium ini boleh menjadi sangat berguna. Agar ini dicipta pada tahun 1925 oleh Kristensen, Lester dan Jurgens, kemudian diubahsuai oleh Kauffmann.

Ia terdiri daripada pluripeptonas dari pencernaan peptik tisu haiwan dan pencernaan pankin kasein, juga mengandungi ekstrak ragi, natrium klorida, laktosa, sukrosa, fenol merah, hijau terang dan agar-agar.

Ia dicirikan dengan menjadi medium yang sangat tidak ramah bagi kebanyakan bakteria, yang memihak kepada pertumbuhan Salmonella, namun beberapa koliform dapat bertahan di dalamnya, membangun lemah.

Adalah penting untuk menyerlahkan bahawa dalam medium ini, genus Shigella tidak berkembang dan tidak Salmonella typhimurium, ni Salmonella paratyphi. Oleh itu, jika dikehendaki mengasingkan mikroorganisma ini, cara lain harus digunakan, seperti XLD agar, antara lain..

Indeks

  • 1 Yayasan
    • 1.1 agar hijau terang
    • 1.2 Varian daripada agar hijau terang (BGA)
  • 2 Persediaan
  • 3 Kegunaan / aplikasi
  • 4 Kawalan kualiti
  • 5 Rujukan

Yayasan

Agar hijau terang

Setiap komponen yang membentuk medium mempunyai fungsi tertentu yang menentukan sifat dan sifat agar.

Pluripeptonas dan ekstrak ragi adalah sumber nutrien dari mana mikroorganisma mengambil nitrogen dan mineral yang diperlukan untuk pembangunan mereka. Laktosa dan sukrosa adalah sumber tenaga untuk mikroorganisma yang mampu menanamnya.

Hijau cerah adalah bahan menghalang yang menghalang perkembangan bakteria Gram-positif dan sejumlah besar mikroorganisma Gram-negatif.

Natrium klorida memberikan kestabilan osmosis kepada medium. Walaupun fenol merah adalah penunjuk pH, ia menjadi warna apabila mengesan pengeluaran asid dari penapaian karbohidrat.

Koloni lactose dan sukrosa tidak menanam tumbuh di medium ini berwarna putih, merah jambu atau telus, di latar belakang merah. Sebagai contoh, bakteria daripada genus Salmonella.

Walaupun bakteria atau sukrosa penapaian laktosa yang mampu berkembang dalam medium ini, mereka membangunkan koloni kehijauan-kuning atau hijau-kuning pada latar belakang kuning-hijau. Contohnya, Escherichia coli dan Klebsiella pneumoniae.

Varian daripada agar hijau terang (BGA)

Ada varian lain agar agar hijau terang; glukosa terang agar novobiocin hijau (NBG) dan novobiocin supaya lactose gliserol hijau terang (NBGL).

Novobiocin supaya glukosa hijau terang (NBG)

Trypticase agar soya mengandungi ferik ammonium sitrat, natrium tiosulfat pentahydrate, fenol merah, glukosa, cemerlang hijau, novobiocin dan air suling.

Hidangan untuk mengasingkan koloni Salmonella dari sampel najis.

Dalam kes ini hijau terang dan novobiocin adalah bahan menghalang yang menghalang pertumbuhan bakteria Gram positif dan beberapa mikroorganisma Gram negatif.

Sodium thiosulfate adalah sumber sulfur dan ferrat sitrat adalah sumber besi, kedua-duanya perlu untuk mendedahkan penghasilan hidrogen sulfida melalui pembentukan cendawan hitam sulfida sulfida.

Glukosa adalah karbohidrat yang boleh fermentasi dan fenol merah adalah penunjuk pH.

Dalam medium ini koloni Salmonella berkembang besar dengan pusat hitam yang dikelilingi oleh halo kemerahan dan diikuti oleh kawasan yang jelas kelihatan. Sesetengah jenis Citrobacter freundii menghasilkan koloni sama dengan Salmonella.

Lilin hijau novobiocin agar gliserol laktosa (NBGL)

Medium ini mengandungi agar soya trypticase, sitrat ammonium ferum, natrium thiosulfat, laktosa, gliserol, hijau terang, novobiocin dan air sulingan.

Perbezaan medium ini dengan yang terdahulu adalah bahawa glukosa digantikan oleh laktosa dan gliserol dan fenol merah tidak digunakan.

Media ini juga digunakan untuk mengasingkan spesies Salmonella, koloni berkembang menjadi hitam, dengan pengeluaran hidrogen sulfida.

Hanya koloni yang tidak menghasilkan asid dari gliserol atau laktosa mencapai pengeluaran H2Ia cukup, kerana pH yang rendah mengganggu pembentukan H2S. Ini menyebabkan koloni berwarna untuk kebanyakan spesies Proteus dan Citrobacter.

Persediaan

-Berat 58 gram media dehidrasi diperolehi secara komersil. Masukkannya dalam satu liter air sulingan berganda. Campurkan, biarkan selama beberapa minit dan serahkan penyediaan kepada sumber haba sehingga larut sepenuhnya.

-Autoklaf pada 121 ° C selama 15 minit, tidak melebihi masa pensterilan.

-Biarkan berdiri dan berkhidmat lebih panas dalam hidangan petri steril. PH akhir hendaklah 6.9 ± 0.2.

-Biarkan mengukuhkan dan simpan dalam peti sejuk sehingga digunakan. Sebelum menanam plat mesti mengambil suhu bilik.

-Medium serbuk hijau dan bersedia untuk mengambil warna oren-coklat atau kemerahan-hijau, bergantung kepada pH dan rumah komersial. Warna yang sangat coklat menunjukkan bahawa agar terlalu panas.

-Setelah agar menjadi padat, tidak disyorkan untuk mengulang, kerana medium merosot.

Kegunaan / aplikasi

Media ini digunakan untuk mencari jenis genus Salmonella dari sampel najis dan makanan tenusu, antara lain..

Kerana ia adalah persekitaran yang agak tidak menyenangkan, disarankan untuk menanam inokulum yang banyak jika sampel langsung digunakan. Jika tidak, pra-pengayaan dan pengayaan spesimen perlu dilakukan sebelum menanam dalam medium ini.

Oleh kerana sesetengah strain Salmonella dihalang atau berkembang dengan kesukaran, disarankan untuk mengiringi medium ini dengan agar selektif lain untuk Salmonella.

Semua koloni dengan ciri Salmonella mesti tertakluk kepada ujian biokimia untuk pengenalpastian muktamad.

Kawalan kualiti

Untuk menguji fungsi baik medium agar hijau terang, strain ATCC dapat digunakan untuk melihat perkembangan yang sama di atasnya..

Strain yang paling sering digunakan untuk kawalan kualiti adalah: Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.

3 pertama mesti memberikan koloni merah jambu atau putih telus pada latar belakang merah. Salmonella dengan perkembangan yang baik dan Proteus dengan pertumbuhan jarang atau biasa.

Klebsiella dan Escherichia dijangka koloni kekuningan kuning-kuning dengan latar belakang kuning dan dalam kes Shigella dan Staphylococcus harus dihalang.

Medium dehidrasi perlu disimpan pada suhu bilik, di tempat yang kering, kerana medium sangat menyerap.

Rujukan

  1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratory S.A. Brilliant Green Agar. 2009
  2. Makmal British Bright Green Agar. 2015.
  3. Makmal BD. BD Brilliant Green Agar. 2013.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologi. (Edisi ke-5). Argentina, Editorial Panamericana S.A..
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Diagnosis mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Argentina Panamericana S.A Editorial