Jenis ujian biokimia, apa yang mereka dan kepentingannya



The ujian biokimia dalam mikrobiologi mereka adalah satu set ujian kimia yang dijalankan ke atas mikroorganisma yang hadir dalam sampel untuk mengenal pasti mereka; Mikroorganisma ini biasanya bakteria. Terdapat sebilangan besar ujian biokimia yang disediakan untuk ahli mikrobiologi.

Walau bagaimanapun, pilihan ujian ini didasarkan pada penemuan awal, seperti corak noda Gram dan watak pertumbuhan, yang membolehkan bakteria ditugaskan ke kategori tertentu. Ujian biokimia adalah berdasarkan sifat-sifat metabolik setiap jenis bakteria. 

Tidak semua bakteria mempunyai sifat yang sama, jadi ia disiasat jika mereka mempunyai enzim tertentu dengan menambah substrat dan menunggu reaksi berlaku. Selalunya penentuan ini diberikan oleh perubahan warna atau pH dalam medium budaya.

Kurang daripada 15 ujian biokimia sering diperlukan untuk mengenal pasti bakteria yang boleh dipercayai sehingga tahap spesies. Melakukan lebih banyak ujian biokimia dapat meningkatkan keyakinan dalam mengenal pasti.

Kebanyakan ujian biokimia ini dijalankan dalam plasma serum atau darah. Walau bagaimanapun, mereka juga boleh dilakukan dalam rembesan biologi lain seperti air kencing, cecair cerebrospinal, cecair pleura dan najis, antara lain..

Indeks

  • 1 Klasifikasi
    • 1.1 Universal
    • 1.2 Pembezaan
    • 1.3 Khusus
  • 2 jenis ujian biokimia
    • 2.1 Ujian catalase
    • 2.2 Ujian oksidase
    • 2.3 Ujian Mannitol Agar Salted (MSA)
    • Ujian koagulase
    • 2.5 Ujian urease
  • 3 Apakah ujian biokimia??
  • 4 Kepentingan
  • 5 Rujukan

Pengkelasan

Ujian biokimia boleh dikelaskan kepada 3 kumpulan:

Universal

Ini adalah ujian yang boleh dilakukan pada mana-mana sampel dan panduan mikrobiologi pada ujian biokimia berikut yang mesti dilakukan untuk mendapatkan identifikasi yang boleh dipercayai..

Contoh

Ujian katalase dan oksidase.

Pembezaan

Ini adalah ujian yang dijalankan untuk mengenal pasti mikroorganisma yang ada dalam sampel sehingga tahap spesies.

Pengenalpastian dibuat berdasarkan keputusan gabungan ujian, kerana hasil individu tidak cukup bermaklumat untuk membuat identifikasi.

Contoh

Ujian IMViC dan ujian penggunaan gula.

Khususnya

Mereka adalah ujian spesifik untuk spesies tertentu atau untuk menyerupai spesies. Ujian ini biasanya dilakukan untuk mengesahkan atau mengenal pasti di peringkat subspesies. Ujian individu adalah bermaklumat sendiri.

Contoh

Ujian γ-Glutamyl aminopeptidase.

Jenis ujian biokimia

Ujian catalase

Ujian catalase adalah ujian untuk menunjukkan kehadiran enzim katalase dengan menguraikan hidrogen peroksida menjadi oksigen dan air. Sebilangan kecil bakteria ditambah kepada setetes hidrogen peroksida (3%) pada slaid.

Ujian katalase adalah ujian mudah yang digunakan oleh ahli mikrob untuk membantu mengenal pasti spesies bakteria dan untuk menentukan keupayaan beberapa mikrob untuk memecahkan hidrogen peroksida dengan menghasilkan enzim katalisase.

Jika gelembung oksigen diperhatikan, ini bermakna bahawa bakterium mempunyai enzim katalase, kerana ia mempercepat penguraian hidrogen peroksida menjadi oksigen dan air. Dikatakan kemudian bahawa organisma adalah katalase positif (contohnya: Staphylococcus aureus).

Ujian oksidase

Ujian ini digunakan untuk mengenal pasti mikroorganisma yang mengandungi enzim sitokrom oksidase (penting dalam rantai pengangkutan elektron). Ia biasanya digunakan untuk membezakan antara keluarga Enterobacteriaceae dan Pseudomadaceae.

Cytochrome oxidase memindahkan elektron dari rantai pengangkutan elektron ke oksigen (penerima elektron akhir) dan mengurangkannya ke air. Ujian oksidase menyediakan molekul donor tiruan dan molekul penerima.

Apabila penderma elektron dioksidakan oleh tindakan cytochrome oxidase, medium menjadi ungu gelap dan dianggap sebagai hasil positif. Mikroorganisma Pseudomonas aeruginosa adalah contoh bakteria oksidase positif.

Mannitol Agar Test (MSA)

Ujian jenis ini bersifat selektif dan berbeza. MSA akan memilih organisme yang mampu hidup di persekitaran dengan kepekatan garam yang tinggi, seperti spesis Staphylococcus Berbeza dengan spesies Streptococcus, yang pertumbuhannya dihalang di bawah syarat-syarat ini.

Komponen berbeza dalam ujian ini ialah mannitol gula. Organisma yang mampu menggunakan manitol sebagai sumber makanan akan menghasilkan hasil penapaian yang berasid dan, oleh itu, akan menurunkan pH medium.

Keasidan medium menyebabkan penunjuk pH, fenol merah, menjadi kuning. Contoh spesies bakteria yang boleh dibezakan dengan kaedah ini ialah: Staphylococcus aureus (positif kerana ia menanam manitol) dan Staphylococcus epidermidis (negatif kerana mannitol tidak menghasilkan).

Ujian koagulase

Coagulase adalah enzim yang membantu membekalkan plasma darah. Ujian ini dijalankan ke atas bakteria gram-positif dan bakteria positif untuk mengenalpasti Staphylococcus aureus (koagulase positif) Malah, koagulase adalah faktor virulen spesies bakteria ini.

Pembentukan gumpalan di sekeliling jangkitan yang disebabkan oleh bakteria ini mungkin melindunginya daripada fagositosis. Ujian ini sangat berguna apabila anda ingin membezakan antara Staphylococcus aureus spesies lain Staphylococcus yang merupakan koagulase negatif.

Ujian urease

Ujian ini digunakan untuk mengenal pasti bakteria yang mampu menghidrolisis urea, menggunakan urease enzim. Ia biasanya digunakan untuk membezakan jantina Proteus bakteria enterik lain.

Hidrolisis urea menghasilkan ammonia sebagai salah satu produknya. Asas lemah ini meningkatkan pH medium di atas 8.4 dan penunjuk pH (fenol merah) berubah dari kuning ke merah jambu. Contoh bakteria urease positif ialah Proteus mirabilis.

Apakah ujian biokimia??

Ujian biokimia dalam mikrobiologi digunakan untuk mendiagnosis penyakit yang disebabkan oleh mikrob dan untuk memantau rawatan yang ditadbir untuk memerangi mereka. Selain itu, ia digunakan untuk pemeriksaan penyakit berjangkit dan prognosisnya..

Pengenalpastian biokimia mikroorganisma menawarkan idea tentang apa yang boleh dilakukan oleh mikroorganisma ini, kerana mungkin diskriminasi jenis strain spesies yang sama dengan profil biokimia tertentu.

Perbezaan dalam aktiviti enzim khusus memberi maklumat tentang ekologi, fisiologi atau habitat semulajadi mikroorganisma, yang dalam beberapa kes boleh dianggap sebagai maklumat penting.

Kepentingan

Perbezaan struktur yang berkaitan dengan bentuk, saiz dan pelupusan bakteria membantu sangat sedikit dalam proses pengenalan, kerana terdapat banyak spesies bakteri yang mempunyai bentuk, ukuran dan pelupusan yang serupa.

Atas sebab ini, akhirnya identifikasi bakteria didasarkan pada perbezaan dalam aktiviti biokimia mereka.

Setiap spesies bakteria mempunyai set metabolik yang jelas dengan pelbagai spesies lain. Ini "cap jari" biokimia adalah sifat yang dikawal oleh enzim bakteria.

Oleh itu, ujian biokimia adalah penting kerana mereka membantu penyelidik untuk mengenal pasti patogen yang betul dalam sampel dan, dengan cara ini, dapat mengesyorkan rawatan yang sesuai kepada pesakit..

Rujukan

  1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Biokimia klinikal (Ed ed.). Wiley-Blackwell.
  2. Clarke, P. H., & Cowan, S. T. (1952). Kaedah biokimia untuk bakteria. Jurnal Mikrobiologi Am, 6(1952), 187-197.
  3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Biokimia klinikal (Edisi ke-5). Elsevier Health Sciences.
  4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Buku Panduan Mikrobiologi Praktikal (Ed ed.). CRC Press.
  5. Harrigan, W. (1998). Kaedah Makmal di Mikrobiologi Makanan (Edisi ke-3). Akademik Akhbar.
  6. Vasanthakumari, R. (2009). Mikrobiologi Praktikal. Penerbitan BI Pvt Ltd.